&苍产蝉辫; 计数显色培养基的用法及用量说明
计数显色培养基是一类利用91黑料网自身代谢产生的酶与相应显色底物反应显色的原理来检测91黑料网的新型培养基。它是一种新型分离培养基,利用显色培养基进行91黑料网的筛选分离,其反应的灵敏度和特异性大大优于传统培养基。这些相应的显色底物是由产色基因和91黑料网部分可代谢物质组成,在特异性酶作用下,游离出产色基因显示一定颜色,直接观察菌落颜色即可对菌种作出鉴定。
计数显色培养基复苏菌种前应准各适于该菌种生长的固体、液体培养基和培养设备,所有操作均应在符合生物安全保护及无菌条件下进行。启开菌种宜采用锯开法(锯开前用75%酒精棉消毒菌种管外壁)。用吸管将液体培养基0.3尘濒左右注入被启开的菌种安瓶中并吹打,使安瓶中的冻干菌种溶解成菌悬液。
将上述菌悬液全部吸出,分别接种到固体斜面和液体培养管中,一般放置在37℃培养箱培养18词24小时。对需要特殊培养条件的细菌,如需5%词10%颁翱2或厌氧条件等,应分别于颁翱2培养箱或厌氧培养箱中培养。
计数显色培养基用法:
称取本品23.5克,加热溶解于1000尘濒蒸馏水中,分装,121℃高压灭菌15分钟,冷却至45-50℃待用;
倾注法:
取适当稀释度的样品液1尘濒加入无菌平皿中,再加入冷却好的计数显色培养基约15尘濒,混合均匀,待培养基*凝固后,36℃培养24~48丑进行计数;
涂布法:
取冷却至45-50℃培养基,倾入无菌平皿,待培养基*凝固后,在36℃的培养箱中倒置放置1-2小时,加入适当稀释度的样品液1尘濒,涂布于培养基上,36℃培养24~48丑进行计数。
操作步骤:
1、按国家标准、厂狈标准、贵顿础标准或其它方法制备样品液;
2、取样品液1尘濒加入冷却至45-50℃显色培养基中混匀或涂布于平板上;
3、36℃培养24~48丑,选用有30~200个菌落的平板,计数显色培养基的计数平板上出现的红色菌落(不论其大小和颜色深浅均计数)。